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DM750双筒荧光显微镜要如何正确使用
发布时间:2020-11-19   点击次数:229次
   DM750双筒荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。
  一、使用方法:
  将材料片放在载物台上。
  开启DM750双筒荧光显微镜稳压器,然后按下启动组点燃紫外灯15min内不得关闭,关闭后3min内不得再启动。
  将激发滤光片转至v,分色片调到v,选用495或475nm阻挡滤光片。
  选用uvFL40、uvFL100荧光接物镜镜检。
  在玻片上加无荧光油,先用40x,再用100x调焦镜检,呈现荧光。
  因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长荧光逐渐变弱,因此镜检时应经常变换视野。
  亦可用uvFL10或uvFL20低倍镜镜检材料(用低倍镜时不加无荧光油)。
  二、记录荧光图像:
  DM750双筒荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上可靠的。随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果,也必须结合主观的判断。
  荧光摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片如ASA200以上或24o以上。因紫外光对荧光猝灭作用大,如FITC的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
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